本实验以大肠杆菌内毒素致家兔温病邪入血分之热瘀气脱证，并采用犀角地黄汤进行治疗，阐明其发挥作用的机制。通过本实验，培养学生制作中医温病模型的思路，锻炼学生运用现代科学手段和方法研究传统中医病证模型的能力，使学生能够把传统的中医理论与现代的科学技术手段有效结合，阐明传统中医理论的现代生物学内涵。
内毒素是革兰阴性细菌细胞壁中的一种成分，叫脂多糖。脂多糖对宿主是有毒性的。内毒素只有细菌死亡溶解或用人工方法破坏菌细胞后才释放出来，所以叫内毒素。其毒性成分主要为类脂质A。内毒素位于细胞壁的最外层，覆盖于细胞壁的黏肽上。各种细菌的内毒素的毒性作用大致相同，可引起发热、微循环障碍、内毒素休克及播散性血管内凝血等。
清洁级家兔，体重2～2.5kg。
器材：注射器，家兔固定笼，BL-生物机能实验系统，血液流变学检测仪。试剂：内毒素，犀角地黄汤。
犀角地黄汤，现选《备急千金要方》卷十二方。组成：芍药三分，地黄半斤，丹皮一两，犀角屑（用代用品）一两。上切。以水一升，煮取四升，去滓，温服一升，一日二三次。功用：清热解毒，凉血散瘀。主治：热入血分证，热迫血溢证。其主治证候包括：①热扰心神，身热谵语，舌绛起刺，脉细数。②热伤血络，斑色紫黑、吐血、衄血、便血、尿血等，舌红绛，脉数。③蓄血瘀热，喜妄如狂，漱水不欲咽，大便色黑易解等。方解：本方治证由热毒炽盛于血分所致。心主血，又主神明，热入血分，一则热扰心神，致躁扰昏狂。二则热邪迫血妄行，致使血不循经，溢出脉外而发生吐血、衄血、便血、尿血等各部位之出血，离经之血留阻体内又可出现发斑、蓄血。三则血分热毒耗伤血中津液，血因津少而浓稠，运行涩滞，渐聚成瘀，故舌紫绛而干。此际不清其热则血不宁，不散其血则瘀不去，不滋其阴则火不熄，正如叶天士所谓“入血就恐耗血动血，直须凉血散血”。治当以清热解毒，凉血散瘀为法。方用苦咸寒之犀角为君，凉血清心而解热毒，使火平热降，毒解血宁。臣以甘苦寒之生地，凉血滋阴生津，一以助犀角清热凉血，又能止血，一以复已失之阴血。用苦微寒之赤芍与辛苦微寒之丹皮共为佐药，清热凉血，活血散瘀，可收化斑之功。四药相配，共成清热解毒，凉血散瘀之剂。本方配伍特点是凉血与活血散瘀并用，使热清血宁而无耗血动血之虑，凉血止血又无冰伏留瘀之弊。
1.试剂的配制 大肠杆菌内毒素使用前以生理盐水配成2g/mL溶液。
2.分组与给药 取体重相近的家兔，称重、编号，随机分为正常对照组、模型组和治疗组，每组6只。除治疗组灌服临床等效量的犀角地黄汤外，对照组和实验组都灌服等体积的生理盐水，每12小时给药1次。
3.模型的制作 实验组每只家兔耳缘静脉注入精制大肠杆菌内毒素（LPS）2g/kg，24小时后再次注入LPS3g/kg，对照组注入等量生理盐水。
4.取材 第二次注射LPS后4小时，对家兔进行心脏采血，进行血生化指标和血液流变学检测。采血后处死动物，观察各脏器情况。
5.指标的检测方法
（1）生命体征的监测：BL-生物机能实验系统测定体温、脉搏、呼吸、血压。
（2）生化指标检测：①凝血功能测定：动物于实验前和第二次注入LPS后4小时心脏穿刺采血，进行血小板计数（BPC）、凝血酶原时间（PT）、纤维蛋白原定量（FG）、白陶土部分凝血活酶时间（KPTT）、复钙时间、血浆鱼精蛋白副凝固试验（3Ptest）测定。②血液流变学指标：测定全血比 黏度、血浆比黏度、血沉、红细胞压积、红细胞电泳时间、纤维蛋白原，计算血沉方程K值、红细胞聚集指数。记录见表6-7。
（3）病理形态学检查：第二次注LPS后4小时，用空气注入法处死动物，解剖，进行肉眼大体观察，同时取肺、心、肝、脾、肾等脏器，放入10%中性福尔马林固定，石蜡包埋切片，肺、肝、脾、肾行HE染色，心脏行磷钨酸苏木精（PTAH）染色，镜检。
6.数据统计 使用SPSS10.0统计软件，采用单因素方差分析比较各组间的差异。
1.-般情况 实验组兔第一次注LPS后，耳充血通红，结膜充血，皮肤、四肢、耳部触之灼热，耸毛，懒动，拒食，口渴，尿赤，多数兔便稀或腹泻，但反应较灵活。第二次注LPS后，耳变苍白，摸之发凉，甚成冰凉，皮肤、四肢不温，结膜变淡，甚至苍白，蜷卧不动，或呈半瘫卧、瘫卧状，尿极赤或呈深褐色，呼吸困难，紫绀，软弱无力，反应迟钝，神志委靡，嗜睡或呈半昏迷状。对照组兔反应灵活，饮食如常，无上述表现。治疗组与实验组比较上述表现有所减轻。
2.生命体征的变化 第一次注射大肠杆菌内毒素LPS后，家兔体温开始上升。第二次注射大肠杆菌内毒素LPS后，家兔体温骤然下降，呼吸脉搏明显增快。
3.生化指标 第二次注入LPS后4小时，实验组BPC减少、FG降低、KPTT及复钙时间延长、3Ptest阳性，与实验前比较有显著性差异。第二次注入LPS后，实验组BPC减少、FG降低程度明显大于对照组，差别有极显著性意义，3Ptest实验组与对照组比较具有显著差异。治疗组与模型组比较，对上述指标均有改善作用。第二次注LPS后4小时，实验组微血栓高切变速率下全血黏度、血浆黏度、红细胞压积、纤维蛋白原含量明显降低，与实验前比较，差别均显著，低切变速率下全血黏度有降低趋势；红细胞电泳时间延长，血沉、血沉方程K增高，与实验前比较差异极显著。对照组除红细胞压积外，其余各项实验前后均无显著差别。第二次注LPS后实验组高切变速率下全血黏度降低、红细胞电泳时间延长、血沉增快、血沉方程K增加、纤维蛋白原降低，与对照组比较，差别均有显著性意义，血浆黏度实验组明显降低，对照组呈增高趋势。治疗组对血液流变学的指标具有改善作用，与模型组比较具有显著差异。
4.病理学观察
（1）大体观察：实验组部分兔皮下腰大肌严重出血，见大片瘀血斑，肺组织广泛瘀血，见灶性、弥漫性出血；肝、脾色紫暗，稍肿胀，肾瘀血，肿胀，肾包膜易剥离，部分肾切面见点状出血灶；心脏切面偶见点状出血。治疗组对上述表现具有改善作用。
（2）镜下观察：实验组动物肺泡壁增厚，肺泡壁毛细血管高度弥漫性瘀血、出血，有少数微血栓。肺泡腔内高度炎性细胞浸润，重度出血，重度浆液渗出，形成多处实变区，见肺水肿，大部分肺泡塌陷，部分肺泡代偿性气肿，肺泡间质静脉血管高度瘀血、出血。见浆液渗出，少数或偶见小静脉混合血栓及纤维素性微血栓。肝小叶内中央静脉、肝窦高度瘀血，重度炎性细胞浸润，见有出血灶。汇管区叶间静脉高度瘀血，或血浆、红细胞、白细胞淤积，偶见混合血栓，小静脉见微血栓形成，汇管区见以白细胞为主的炎症细胞浸润，呈汇管区炎，肝细胞浊肿，胞浆疏松，见点状、灶状坏死。皮质肾小球毛细血管丛高度瘀血，细胞数增多，体积变大，偶见微血栓，皮质和髓质、间质毛细血管及小静脉高度瘀血、出血，见浆液渗出、水肿。心肌间质毛细血管、小静脉高度瘀血，局灶性出血，偶见微血栓。心肌见局灶性坏死，嗜酸性变。脾红髓内血窦、白髓毛细血管高度瘀血，见出血灶，红髓内血窦偶见微血栓。对照组动物脏器组织未见上述病理变化，治疗组动物的组织病理学改变轻于实验组。
1.温病卫、气、营、血四阶段的特征临床表现是什么？
2.热入血分证治疗的典型方剂是什么？
3.温病血分证出现的病理学基础是什么？